(1)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 如何确定平板上某单个菌落是否为纯培养？请写出实验的主要步骤。

【◆参考答案◆】：通过观察菌落特征；单个菌落再次划线分离。

(2)【◆题库问题◆】：[单选] 原核细胞的DNA合成场所在细胞的（）。
A．质膜上
B．原生质中
C．拟核中
D．间体上

【◆参考答案◆】：A

(3)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 简述细菌荚膜的主要生理功能及其与人类的关系。

【◆参考答案◆】：生理功能：保护作用，使菌体免受干旱损伤或白细胞的吞噬；细胞外贮藏养料，当外环境缺乏营养时重新利用；堆积某些代谢废物；粘附作用，使菌体附着于物体表面。与人类关系：有的可用于制备代血浆或葡聚糖凝胶试剂；有的可提取胞外多糖用于石油开采钻井液添加剂或印染、食品等工业；有的菌胶团可用于污水处理。有害：污染糖厂的糖液或牛奶、酒类、面包等饮料和食品；有的引起龋齿。

(4)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 化能自养和化能异养微生物的主要区别是什么？细菌属于哪一类？引起人类疾病的微生物又属于哪一类？

【◆参考答案◆】：化能自养型以CO2作为唯一或主要碳源，以氧化无机物释放的化学能为能源，利用无机物作为电子供体还原CO2合成细胞有机物质。化能异养型以有机物为碳源，以氧化有机物产生的化学能为能源，利用有机物作为电子供体合成细胞有机物质。细菌中既有化能自养型，又有化能异养型。

(5)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 显微镜直接计数法的局限性是什么？

【◆参考答案◆】：①不能区分死活细胞；②一些小的细胞在显微镜下很难看到，有些细胞也可能被丢失；③很难获得精确的计算；④样品不被染色时，需要相差显微镜；⑤对低浓度悬浮液不适用。细菌悬浮液细胞浓度低于106个时，视野中无菌；⑥计数前须对运动的细胞固定。

(6)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段？

【◆参考答案◆】：从供体细胞（主要是原核微生物）提取染色体DNA构建基因库，再筛选出基因克隆，或通过PCR扩增出目的基因的DNA片断。从供体细胞（主要是真核生物）提取总RNA（或总mRNA.然后逆转录为cDNA，构建cDNA库，筛选出cDNA克隆或通过RT-PCR扩增出目的基因的cDNA。用化学合成法合成目的基因。

(7)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 简述现代微生物学发展的6大趋势。

【◆参考答案◆】：1〕研究工作向着纵深方向和分子水平发展；2〕一批新的学科正在形成；3〕微生物学与其他学科间的渗透、义叉和融合，形成新的边缘学科；4〕新技术、新方法在微生物学中的广泛应用；5〕向着复合生态系统和宏观范围拓宽；6〕一大批应用性高技术微生物学分科正在孕育和形成。（任选5项）

(8)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 在使用高压蒸汽锅灭菌时，怎样杜绝一切不安全的因素？

【◆参考答案◆】：（1）在灭菌前一定要检查灭菌锅中是否有水，若没有水或水不够要及时加水（最好是去离子水）否则灭菌锅可能会烧干而引起炸裂事故。（2）灭菌结束后，注意压力一定要降到0，才能打开排气阀，开盖取物。否则就会因为锅内压力突然下降，使容器内培养基由于内外压力不平衡而冲出，造成棉塞沾染培养基而发生污染，甚至灼烧操作者。（3）灭菌时，旁边一定要有人观察灭菌锅是否处于正常使用状态。

(9)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 将重组载体导入大肠杆菌细胞有哪几种方法？试简述之。

【◆参考答案◆】：若以质粒DNA或噬菌体DNA作为载体时：重组载体通过转化（或转染）进入E.coli感受态细胞；用电穿孔法将重组载体DNA直接导入E.coli细胞（不需制备感受态细胞）。若以λ噬菌体作为载体时：携带外源DNA的λ噬菌体通过感染而将外源DNA带入E.coli细胞中。

(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 比较底物水平磷酸化、氧化磷酸化和光合磷酸化。

【◆参考答案◆】：底物水平磷酸化——ATP经过特定的酶催化有机物分解代谢产生，磷酸基团被加到某种中间产物上，最终将磷酸基团转移到ADP上形成ATP。氧化磷酸化——ATP的产生是以消耗膜内外质子动力为代价的，质子动力的形成与ATP合成的偶联，是通过一种称之为ATP合成酶的膜蛋白完成的。光合磷酸化——发生在光合作用有机体中，机制与氧化磷酸化机制相似，不同的是在光合磷酸化过程中，是光推动了产生质子动力的氧化反应。