分子杂交技术分子杂交技术

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分子杂交技术

(1)【◆题库问题◆】:[名词解释] 分子杂交技术

【◆参考答案◆】:
是在研究DNA分子复性变化基础上发展起来的一种技术。其原理是,具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段,在适当条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA,DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。

(2)【◆题库问题◆】:[名词解释] fluorescence photobleaching recovery;FPR (荧光漂白恢复)

【◆参考答案◆】:研究膜蛋白和脂质平移扩散以及溶质通过质膜和在细胞内转运的一种技术。包括三个步骤:荧光染料与膜成分交联;激光照射猝灭(漂白)膜上部分荧光;检测猝灭部位荧光再现速率(由于膜成分的流动性)。

(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] 放射自显影术

【◆参考答案◆】:
用于研究标记化合物在机体、组织和细胞中的分布、定位、排出以及合成、更新、作用机理、作用部位等,其原理是将放射性同位素(如14C和3H)标记的化合物导入生物体内,经过一段时间后,将标本制成切片或涂片,涂上卤化银乳胶,经一定时间的放射性曝光,组织中的放射性即可使乳胶感光。然后经过显影、定影处理显示还原的黑色银颗粒,即可得知标本中标记物的准确位臵和数量,放射自显影的切片还可再用染料染色,这样便可在显微镜下对标记上放射性的化合物进行定位或相对定量测定。

(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] electron microscope three-dimentional reconstruction technique (电镜三维重构技术)

【◆参考答案◆】:电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合,是当前结构生物学,主要研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。

(5)【◆题库问题◆】:[问答题] 简述冰冻蚀刻技术。

【◆参考答案◆】:
冰冻蚀刻技术亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻。蚀刻后,再向断裂面上喷涂一层蒸气碳和铂。然后将组织溶掉,把金属薄膜剥下来,此膜即为复膜。复膜显示出了标本蚀刻画的形态,可置于电镜下观察。电镜下的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。

(6)【◆题库问题◆】:[名词解释] electron microscope (电子显微镜)

【◆参考答案◆】:一类用电子束为光源,显示标本超微结构的显微镜。分为透射电子显微镜和扫描电子显微镜等。

(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] scanning electron microscope;SEM (扫描电子显微镜)

【◆参考答案◆】:是1965年发明的较现代的细胞生物学研究工具,主要是利用二次电子信号成像来观察样品的表面形态,即用极狭窄的电子束去扫描样品,通过电子束与样品的相互作用产生各种效应,其中主要是样品的二次电子发射。二次电子能够产生样品表面放大的形貌像,这个像是在样品被扫描时按时序建立起来的,即使用逐点成像的方法获得放大像。扫描电子显微镜的制造是依据电子与物质的相互作用。

(8)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 放射自显影技术的原理根据是什么?为何常用H3、C14、P32标记物做放射自显影?

【◆参考答案◆】:1)原理根据:放射性同位素发射出的各种射线具有使照相乳胶中的溴化银晶体还原(感光)的性能。利用放射性物质使照相乳胶膜感光,再经显影以显示该物质自身的存在部位.2)用H3、C14、P32标记物做放射自显影原因:(1)有机大分子均含有碳、氢原子,DNA和RNA等物质中存在磷元素,(2)且C14和H3均为弱β放射性同位素,半衰期长。

(9)【◆题库问题◆】:[单选] 光学显微镜有一个放大倍数为40的物镜和放大倍数为10的目镜,成像的总放大倍数是()
A.40×
B.50×
C.400×
D.450×
E.1000&time

【◆参考答案◆】:C

(10)【◆题库问题◆】:[名词解释] micromanipulation technique(显微操作技术)

【◆参考答案◆】:是指在高倍复式显微镜下,利用显微操作器(micromanipulator)进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装置。显微操作技术包括细胞核移植、显微注射、嵌合体技术、胚胎移植以及显微切割等。

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