(1)【◆题库问题◆】:[名词解释] electron microscope three-dimentional reconstruction technique (电镜三维重构技术)
【◆参考答案◆】:电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合,是当前结构生物学,主要研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。
(2)【◆题库问题◆】:[问答题] 简述动物转基因技术的过程。
【◆参考答案◆】:
转基因动物技术是一项复杂而且涉及内容广泛的技术,其制作过程如下:
(1)克隆目的基因;
(2)给目的基因接上适当的启动子元件;
(3)外源基因的导入,即利用显微操作或其他方法将外源基因注射到动物早期胚胎中,再把胚胎植入动物子宫内;
(4)外源基因整合与表达的检测。转入基因一般是随机整合到宿主动物基因组,但并非所有的外源基因都能整合到动物基因组,而整合的基因也并非都能表达。因此需要对转基因动物进行严格的检测和筛选。在转基因动物制作中,基因转移是影响外源基因整合效率的关键步骤,也是技术难度最大的步骤。
转基因动物技术是一项复杂而且涉及内容广泛的技术,其制作过程如下:
(1)克隆目的基因;
(2)给目的基因接上适当的启动子元件;
(3)外源基因的导入,即利用显微操作或其他方法将外源基因注射到动物早期胚胎中,再把胚胎植入动物子宫内;
(4)外源基因整合与表达的检测。转入基因一般是随机整合到宿主动物基因组,但并非所有的外源基因都能整合到动物基因组,而整合的基因也并非都能表达。因此需要对转基因动物进行严格的检测和筛选。在转基因动物制作中,基因转移是影响外源基因整合效率的关键步骤,也是技术难度最大的步骤。
(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] ultramicrotomy (超薄切片技术)
【◆参考答案◆】:电子书穿透力很弱,须将标本制成40~50nm的超薄切片。方法与步骤:固定;脱水;包埋;切片;染色。
(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] 分辨率
【◆参考答案◆】:
指人眼或显微镜在25cm明视距离处,能分辨被检物体细微结构最小距离的能力,其单位为长度单位,常用的有毫米、微米、纳米等。
指人眼或显微镜在25cm明视距离处,能分辨被检物体细微结构最小距离的能力,其单位为长度单位,常用的有毫米、微米、纳米等。
(5)【◆题库问题◆】:[问答题] 简述光镜上调节光线强弱的装置有哪些。
【◆参考答案◆】:
光学显微镜上调节光线强弱的装置有反光镜、聚光镜和光阑。
(1)反光镜:反光镜是安装在镜台下面、镜柱前方的—面可转动的圆镜。用来调节光线,能将来自不同方向的光线收集起来反射到聚光镜中。
(2)聚光镜:聚光镜是位于镜台下方的—组透镜,用以汇集光线使其成束,增强照明度和视野的亮度。
(3)光阑:光阑是位于聚光镜底部的一个圆环状结构,装有多片半月形的薄金属片,叠合在中央形成弧形孔。圆环外源的突起小柄可调节金属片的分开或合拢,作用是调节光线强弱,使物像变得清晰。
光学显微镜上调节光线强弱的装置有反光镜、聚光镜和光阑。
(1)反光镜:反光镜是安装在镜台下面、镜柱前方的—面可转动的圆镜。用来调节光线,能将来自不同方向的光线收集起来反射到聚光镜中。
(2)聚光镜:聚光镜是位于镜台下方的—组透镜,用以汇集光线使其成束,增强照明度和视野的亮度。
(3)光阑:光阑是位于聚光镜底部的一个圆环状结构,装有多片半月形的薄金属片,叠合在中央形成弧形孔。圆环外源的突起小柄可调节金属片的分开或合拢,作用是调节光线强弱,使物像变得清晰。
(6)【◆题库问题◆】:[单选] 鉴别培养细胞中的死细胞时常用()
A.甲苯胺蓝
B.次甲基蓝
C.考马斯亮蓝
D.台盼蓝
E.甲基蓝
A.甲苯胺蓝
B.次甲基蓝
C.考马斯亮蓝
D.台盼蓝
E.甲基蓝
【◆参考答案◆】:D
(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] transmission electron microscope;TEM (透射电子显微镜)
【◆参考答案◆】:在一个高真空系统中,由电子枪发射电子束,穿过被研究的样品,经电子透镜聚焦放大,在荧光屏上显示出高度放大的物像,还可作摄片记录的一类最常见的电子显微镜。
(8)【◆题库问题◆】:[名词解释] fluorescence photobleaching recovery;FPR (荧光漂白恢复)
【◆参考答案◆】:研究膜蛋白和脂质平移扩散以及溶质通过质膜和在细胞内转运的一种技术。包括三个步骤:荧光染料与膜成分交联;激光照射猝灭(漂白)膜上部分荧光;检测猝灭部位荧光再现速率(由于膜成分的流动性)。
(9)【◆题库问题◆】:[名词解释] 密度梯度离心
【◆参考答案◆】:
是细胞组分通过某些梯度密度溶液离心使得各个成分互相分开的技术.操作时应将要分离细胞组分小心地铺在含有密度不断增加的、形成密度梯度的高溶解性的惰性物质(如蔗糖)溶液的表面。在这种条件下进行离心,不同组分以不同的沉降速率沉降,形成不同的沉淀带,而使不同的组分得以分离。
是细胞组分通过某些梯度密度溶液离心使得各个成分互相分开的技术.操作时应将要分离细胞组分小心地铺在含有密度不断增加的、形成密度梯度的高溶解性的惰性物质(如蔗糖)溶液的表面。在这种条件下进行离心,不同组分以不同的沉降速率沉降,形成不同的沉淀带,而使不同的组分得以分离。
(10)【◆题库问题◆】:[名词解释] immunoblotting (免疫印迹)
【◆参考答案◆】:又称蛋白质印迹(Westernblotting),是根据抗原抗体的特异性结合检测复杂样品中的某种蛋白的方法。该法是在凝胶电泳和固相免疫测定技术基础上发展起来的一种新的免疫生化技术。