简述冰冻蚀刻技术。简述冰冻蚀刻技术。

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简述冰冻蚀刻技术。

(1)【◆题库问题◆】:[问答题] 简述冰冻蚀刻技术。

【◆参考答案◆】:
冰冻蚀刻技术亦称冰冻断裂。标本置于干冰或液氮中,进行冰冻。然后用冷刀骤然将标本断开,升温后,冰在真空条件下迅即升华,暴露出了断裂面的结构。冰升华暴露出标本内部结构的步骤称为蚀刻。蚀刻后,再向断裂面上喷涂一层蒸气碳和铂。然后将组织溶掉,把金属薄膜剥下来,此膜即为复膜。复膜显示出了标本蚀刻画的形态,可置于电镜下观察。电镜下的影像即代表标本中细胞断裂面处的结构。

(2)【◆题库问题◆】:[名词解释] video-enhance microscopy(录像增差显微镜技术)

【◆参考答案◆】:计算机辅助的DIC显微镜可在高分辨率下研究活细胞中的颗粒及细胞器的运动。

(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] 细胞株

【◆参考答案◆】:
原代培养的细胞一般传至10代左右就不易传下去了,细胞生长出现停滞,大部分细胞衰老死亡,但有极少数细胞可渡过危机而存活下去。这些存活的细胞一般可顺利地传40~50代次,并且仍然保持原来染色体的二倍体数量及接触抑制的行为。很多学者把这种传代细胞称为细胞株。一般情况下,当细胞株传至50代后又要出现危机,不能再传下去。但如有部分细胞发生了遗传突变,产生癌细胞的特点,有可能在培养条件下无限制地传下去,这种传代细胞称为细胞系。细胞系细胞的根本特点是染色体明显改变,一般呈现亚二倍体或非整倍体,失去接触抑制的细胞容易传代培养。

(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] 核酸的杂交

【◆参考答案◆】:通过互补的DNA或RNA探针与研究的DNA或RNA之间进行碱基配对,分离或鉴定特异的核酸片断。也可用于比较两个核酸之间的相似性。

(5)【◆题库问题◆】:[多选] 关于透射式电子显微镜,下列哪项叙述是错误的()
A.适于观察细胞的外表形貌
B.以电子束作为光源
C.电子透过标本后在荧光屏上成像
D.分辨力较高
E.样品要采用有机染料染色

【◆参考答案◆】:A, E

(6)【◆题库问题◆】:[单选] 关于光学显微镜,下列哪项有误()
A.是利用光线照明,将微小物体形成放大影像的仪器
B.细菌和线粒体在光镜下能清晰可见
C.由机械系统、光学系统和机械装置三大部分构成
D.可用于观察细胞的显微结构
E.其分辨力由目镜决定

【◆参考答案◆】:E

(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] cell culture(细胞培养)

【◆参考答案◆】:把机体内的组织取出后经过分散(机械方法或酶消化)为单个细胞,在人工培养的条件下,使其生存、生长、繁殖、传代,观察其生长、繁殖、接触抑制、衰老等生命现象的过程。

(8)【◆题库问题◆】:[名词解释] cell fusion(细胞融合)

【◆参考答案◆】:也称细胞杂交技术(cell   hybridization),两个或多个细胞融合成一个双核细胞或多核细胞的现象。一般通过灭活的病毒或化学物质介导,也可通过电刺激融合。

(9)【◆题库问题◆】:[名词解释] Hybridoma(杂交瘤)

【◆参考答案◆】:一种通过融合而形成的杂交细胞,是由正常细胞和具有某种缺陷的肿瘤细胞杂交而获得。

(10)【◆题库问题◆】:[名词解释] fluorescence resonance energy transfer (荧光共振能量转移)

【◆参考答案◆】:当一个荧光分子(又称为供体分子)的荧光光谱与另一个荧光分子(又称为受体分子)的激发光谱相重叠时,供体荧光分子的激发能诱发受体分子发出荧光,同时供体荧光分子自身的荧光强度衰减。FRET程度与供、受体分子的空间距离紧密相关,一般为7~10nm时即可发生FRET;随着距离延长,FRET呈显著减弱。

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