(1)【◆题库问题◆】:[单选] 利用放射性核素标志物质能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是()
A.放射自显影技术
B.免疫荧光显微镜技术
C.免疫电镜技术
D.液相杂交技术
E.原位杂交技术
A.放射自显影技术
B.免疫荧光显微镜技术
C.免疫电镜技术
D.液相杂交技术
E.原位杂交技术
【◆参考答案◆】:A
(2)【◆题库问题◆】:[单选] 细胞原代培养实验中,首先应注意的问题是()
A.无菌操作
B.细胞消化时间
C.添加培养液的量
D.培养液的浓度
A.无菌操作
B.细胞消化时间
C.添加培养液的量
D.培养液的浓度
【◆参考答案◆】:A
(3)【◆题库问题◆】:[问答题] 细胞培养应注意哪些问题?
【◆参考答案◆】:
体外培养细胞必须注意三个环节:物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分:但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以,在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括促细胞生长因子(如EGF.,促贴附物(如层黏连蛋白)和其他活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种,即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细胞培养也是至关重要的。
体外培养细胞必须注意三个环节:物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分:但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以,在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括促细胞生长因子(如EGF.,促贴附物(如层黏连蛋白)和其他活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种,即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细胞培养也是至关重要的。
(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] homokaryon (同核融合细胞)
【◆参考答案◆】:由基因型相同的细胞融合而成的。
(5)【◆题库问题◆】:[问答题] 从光源、透镜、成像和分辨力四方面比较电镜和光镜。
【◆参考答案◆】:
电镜和光镜从光源、透镜、成像和分辨力四方面不同。
(1)光源的不同:光学显微镜利用可见光作为光源,照明部分包括反光镜、聚光镜和光阑,可对入射光线进行集光并调节其强弱。电镜是以电子束代替光源,以一根钨丝作为阴极发射电子,电子受到阳极吸引而加快速度,加速的电子通过阳极的微孔形成电子束,构成照明源。
(2)透镜的不同:光学显微镜的透镜由物镜、目镜组成,每种镜头由2~3个玻璃透镜构成,由于可见光能在空气中直线前进,所以玻璃透镜可直接在空气中工作。电子显微镜使用产生轴对称磁场的精密线圈作为电磁透镜,以电磁场透镜代替玻璃透镜,但因为电子撞击空气分子将发生散射而不能直线前进,所以,镜筒中的空气必须抽出,保持高度真空。
(3)成像的不同:光学显微镜是通过物镜和目镜的—组玻璃透镜将标本上的微小物体放大成像。在电子显微镜下,标本通过一个气闸送入真空镜筒,经聚光镜汇聚的平行电子束被物镜、中间镜和投影镜多级放大,最后在荧光屏上成像即时观察,或投射到照相底片上成像使底片感光作为永久记录。
(4)分辨力不同:光学显微镜分辨力可达200nm(油镜),电子显微镜分辨力为0.1nm。
电镜和光镜从光源、透镜、成像和分辨力四方面不同。
(1)光源的不同:光学显微镜利用可见光作为光源,照明部分包括反光镜、聚光镜和光阑,可对入射光线进行集光并调节其强弱。电镜是以电子束代替光源,以一根钨丝作为阴极发射电子,电子受到阳极吸引而加快速度,加速的电子通过阳极的微孔形成电子束,构成照明源。
(2)透镜的不同:光学显微镜的透镜由物镜、目镜组成,每种镜头由2~3个玻璃透镜构成,由于可见光能在空气中直线前进,所以玻璃透镜可直接在空气中工作。电子显微镜使用产生轴对称磁场的精密线圈作为电磁透镜,以电磁场透镜代替玻璃透镜,但因为电子撞击空气分子将发生散射而不能直线前进,所以,镜筒中的空气必须抽出,保持高度真空。
(3)成像的不同:光学显微镜是通过物镜和目镜的—组玻璃透镜将标本上的微小物体放大成像。在电子显微镜下,标本通过一个气闸送入真空镜筒,经聚光镜汇聚的平行电子束被物镜、中间镜和投影镜多级放大,最后在荧光屏上成像即时观察,或投射到照相底片上成像使底片感光作为永久记录。
(4)分辨力不同:光学显微镜分辨力可达200nm(油镜),电子显微镜分辨力为0.1nm。
(6)【◆题库问题◆】:[名词解释] immunofluorescent technique;immunofluorescence technique (免疫荧光技术)
【◆参考答案◆】:将免疫学方法(抗原抗体特异结合)与荧光标记技术结合起来研究特异蛋白抗原在细胞内分布的方法。由于荧光素所发的荧光可在荧光显微镜下检出,从而可对抗原进行细胞定位。
(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] flowcytometer(流式细胞仪)
【◆参考答案◆】:主要应用:用于定量测定细胞中的DNA.RNA或某一特异蛋白的含量;测定细胞群体中不同时相细胞的数量;从细胞群体中分离某些特异染色的细胞;分离DNA含量不同的中期染色体。
(8)【◆题库问题◆】:[名词解释] 分子杂交技术
【◆参考答案◆】:
是在研究DNA分子复性变化基础上发展起来的一种技术。其原理是,具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段,在适当条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA,DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。
是在研究DNA分子复性变化基础上发展起来的一种技术。其原理是,具有互补核苷酸序列的两条单链核苷酸分子片段,在适当条件下,通过氢键结合,形成DNA-DNA,DNA-RNA或RNA-RNA杂交的双链分子。这种技术可用来测定单链分子核苷酸序列间是否具有互补关系。
(9)【◆题库问题◆】:[多选] 关于光学显微镜,下列哪项有误()
A.是利用光线照明,将微小物体形成放大影像的仪器
B.细菌和线粒体在光镜能清晰可见
C.由机械系统和光学系统两大部分构成
D.可用于观察细胞的显微结构
E.其分辨力由目镜决定
A.是利用光线照明,将微小物体形成放大影像的仪器
B.细菌和线粒体在光镜能清晰可见
C.由机械系统和光学系统两大部分构成
D.可用于观察细胞的显微结构
E.其分辨力由目镜决定
【◆参考答案◆】:A, C, E
(10)【◆题库问题◆】:[单选] 在差速离心中最先沉降的细胞器是()
A.线粒体
B.溶酶体
C.核
D.氧化物酶体
E.内质网
A.线粒体
B.溶酶体
C.核
D.氧化物酶体
E.内质网
【◆参考答案◆】:C