(1)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 在干热灭菌操作过程中应注意哪些问题，为什么？

【◆参考答案◆】：灭菌前：[1]电热干燥箱中玻璃器皿不要放置地过于紧密，否则会灭菌不够彻底[2]开始灭菌，设定温度为160℃，当干燥箱中温度达到160℃时，灭菌1~2h[3]注意干热灭菌过程严防恒温调节的自动控制失灵而造成安全事故，灭菌时人不能离开灭菌后：[4]不要立即打开电热干燥箱，否则会因为内外温差过大而引起玻璃器皿的破裂，灭菌结束后应先关闭电源，放置一段时间后再拿出。

(2)【◆题库问题◆】：[单选] 基因工程中值得注意观察之一是（）。
A．病毒能在细菌中复制
B．细菌能够吸收环境中的DNA
C．细菌能够彼此接合
D．外源基因能够放到细菌中而且能够表达

【◆参考答案◆】：D

(3)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 为什么乙醇很容易使革兰氏阴性菌脱色，而革兰氏阳性菌不行？

【◆参考答案◆】：革兰氏阳性菌和革兰氏阴性菌细胞壁结构上的差异被认为在革兰氏染色反应中有所不同。革兰氏染色中，细胞内形成一种不溶性的结晶紫-碘复合物，这种复合物可以用乙醇从革兰氏阴性菌中抽提出来，但不能从革兰氏阳性菌中抽提出来。因为，革兰氏阳性菌有由几层肽聚糖形成的很厚的细胞壁，能被乙醇脱水，导致闭上小孔更小甚至关闭，从而阻止了不溶性结晶紫-碘复合物从细胞中逸出。相反，革兰氏阴性菌中乙醇很容易渗入富含脂质的外膜，将结晶紫-碘复合物从细胞中抽提出来。

(4)【◆题库问题◆】：[单选] 预计在（）的土壤中能的发现真菌。
A．富含氮化合物
B．酸性
C．中性
D．还有细菌和原生生物

【◆参考答案◆】：B

(5)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 为什么在食品灭菌中，电离辐射比紫外线更加有效？

【◆参考答案◆】：主要的原因是紫外线不能穿透固体、不透明体和能吸光的表面，因此仅限于物体的表面消毒。电离辐射是一种高能的电磁辐射，常用的两类电离射线γ射线和χ射线都有较高的能量和穿透力，能有效抑制固体或液体中微生物的生长。

(6)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 何谓转化？细菌进行转化的必要条件是什么？

【◆参考答案◆】：转化：受体菌直接吸收外源DNA片段，通过交换，并把它整合到自己基因组中，再经复制就使自已变成一个转化子。转化的必要条件：外源DNA：一般分子量为1106。呈质粒形式DNA转化率最高。受体菌必须处于感受态，例如利用CaCl2处理E.coli，即可使其呈感受态。

(7)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 举例说明营养体既可是单售体又可是二倍体的酵母菌的生活史。

【◆参考答案◆】：如酿酒酵母：子囊孢子萌发成单倍体营养体细胞，单倍体营养体出芽繁殖；两个单倍细胞结合，质配，核配成二倍体细胞，二倍体营养体出芽繁殖；在特定条件下，二倍体减数分裂形成4个子囊孢子的子囊，子囊成熟，破裂，释放子囊孢子。（也可用图示法回答）

(8)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 比较革兰氏阳性菌、革兰氏阴性菌和抗酸细菌的细胞壁。

【◆参考答案◆】：革兰氏阳性菌的细胞壁有相当厚度的肽聚糖层，约占细胞壁的60-90%。肽聚糖层与细胞膜的外表面紧密相连。另含有少量磷壁酸，一般含蛋白质及脂类较少。缺少外膜和周质空间，消化酶酶类并不是保留在周质间隙中，而是被释放到周围环境中。革兰氏阴性菌的细胞壁比革兰氏阳性菌的薄，但更复杂。细胞壁中只有10-20%是肽聚糖，其余是大量的脂蛋白和脂多糖。细胞壁外有一层外膜，构成了细胞壁的外表面，并留下一个非常狭窄的周质间隙。细胞壁的内表面与细胞膜之间被一个较宽的周质间隙隔开。毒素和酶在周质间隙中保持一定浓度。抗酸细菌的细胞壁像革兰氏阳性菌一样比较厚，但其中含有60%的脂，而肽聚糖含量很少。

(9)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 显微镜直接计数法的局限性是什么？

【◆参考答案◆】：①不能区分死活细胞；②一些小的细胞在显微镜下很难看到，有些细胞也可能被丢失；③很难获得精确的计算；④样品不被染色时，需要相差显微镜；⑤对低浓度悬浮液不适用。细菌悬浮液细胞浓度低于106个时，视野中无菌；⑥计数前须对运动的细胞固定。

(10)【◆题库问题◆】：[问答题,简答题] 试列举微生物学中3项最重要的独特技术，并分别说出其创始人、基本原理及其对发展微生物学的贡献。

【◆参考答案◆】：显微镜技术：由列文虎克等创始。他制造的单式微镜通过光学放大原理使人眼的分辨率从mm水平提高到μm水平，从而使原来无法见到的微生物世界显露其原形。由此开创了微生物的形态和分类方面的研究。无菌技术：由巴斯德等发明，其原理是利用物理、化学因素来杀死、抑制或阻留微生物。由巴斯德设计的曲颈瓶试验不但创立了胚种学说，而且为消毒、灭菌无菌等技术提供了可靠的理论基础。纯种分离技术：由科赫等创建。其原理是通过稀释的方法，将原先呈杂居混生状态的众多微生物个体进行分散，然后让每一个分散的个体繁殖成一个个单菌落以达到纯种分离的目的。此法使人类真正认识了各种病原体，并促进纯种发酵技术的建立和微生物学的研究。