在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段?在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段?

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在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段?

(1)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 在基因工程中可通过哪3种途径获得目的基因的DNA片段?

【◆参考答案◆】:从供体细胞(主要是原核微生物)提取染色体DNA构建基因库,再筛选出基因克隆,或通过PCR扩增出目的基因的DNA片断。从供体细胞(主要是真核生物)提取总RNA(或总mRNA.然后逆转录为cDNA,构建cDNA库,筛选出cDNA克隆或通过RT-PCR扩增出目的基因的cDNA。用化学合成法合成目的基因。

(2)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 影响显微镜分辨率的因素有哪些?

【◆参考答案◆】:物镜的NA值(物镜的数值孔径)与照明光源的波长

(3)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 什么叫生长因子,它包括哪些化合物?什么叫原生营养型?什么叫营养缺陷型?

【◆参考答案◆】:生长因子是一类调节微生物正常代谢所必需,但不能用简单的碳、氮源自行合成的有机物。生长因子包括维生素、碱基、卟啉及其衍生物、甾醇、胺类、C4~C6的分支或直链脂肪酸,有时还包括氨基酸营养缺陷突变株所需要的氨基酸在内,而狭义的生长因子一般仅指维生素。原生营养型(生长因子自养型微生物):它们不需要从外界吸收任何生长因子,多数真菌、放线菌和不少细菌,如E.coli等。营养缺陷型(生长因子异养型微生物):它们需要从外界吸收多种生长因子才能维持正常生长,如各种乳酸菌、动物致病菌、支原体和原生动物等。

(4)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 以金黄色葡萄球菌为例,试述其肽聚糖合成的途径。

【◆参考答案◆】:根据反应的部位的不同,可分为在细胞质中合成,在细胞膜上合成以及在细胞膜外合成三个阶段。⑴在细胞质中,由葡萄糖合成N-乙酰葡萄糖胺和N-乙酰胞壁酸,然后,由N-乙酰胞壁酸合成UDP-N-胞壁酸五肽。⑵在细胞膜上,UDP-N-胞壁酸五肽掺入细胞膜并进一步接上N-乙酰葡萄糖胺和甘氨酸五肽桥,该过程必须有细菌萜醇的参与。⑶在细胞膜外,已合成的肽聚糖单体插入到细胞膜外的细胞壁生长点处,然后通过转肽酶的转肽作用,最终使前后两条多糖链间形成甘氨酸五肽桥而发生纵向交联,从而形成新的肽聚糖。

(5)【◆题库问题◆】:[填空题] 微生物学发展的奠基者是法国的巴斯德,他对微生物学的建立和发展作出卓越的贡献,主要集中体现()学说、免疫学——预防接种和证实发酵是由微生物引起的;而被称为细菌学奠基者是()国的(),他也对微生物学建立和发展作出卓越贡献,主要集中体现建立了()和()。

【◆参考答案◆】:彻底否定了“自生说”;德;柯赫;细菌纯培养技术;提出了柯赫法则

(6)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 光面内质网与粗面内质网有何不同?

【◆参考答案◆】:光面内质网上没有核糖体的附着,参与脂类的合成和碳水化合物代谢,粗面内质网上有核糖体的附着,可与核糖体一起参与糖蛋白的合成。

(7)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 病毒分类单元中“科”“属”“种”的范围。

【◆参考答案◆】:科——ICTV使用的最高分类单元,依据核酸类型、衣壳对称性、28有无被膜或大小。属——虽已设立,但因新出现,所以接受慢。种——有同样的基因组和宿主关系。

(8)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 举例说明微生物多样性和环境适应性及其用于农业生产中的实例。

【◆参考答案◆】:五个共性对人类来说是既有利又有弊的。我们学习微生物学的目的在于能兴利除弊、趋利避害。人类利用微生物(还可包括单细胞化的动、植物)的潜力是无穷的。通过本课程的学习,要使自己努力达到能在细胞、分子和群体水平上认识微生物的生命活动规律,并设法联系生产实际,为进一步开发、利用或改善有益微生物,控制、消灭或改造有害微生物打好坚实的基础。

(9)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 明胶半固体培养基与琼脂半固体培养基在应用上有何不同?

【◆参考答案◆】:明胶半固体培养基:主要用以检测微生物是否产生胞外蛋白酶。琼脂半固体培养基:细菌的动力观察、趋化性研究、厌氧菌的培养、计数等、细菌酵母菌的保藏。

(10)【◆题库问题◆】:[问答题,简答题] 高压蒸汽灭菌开始之前为什么要将灭菌锅的冷空气排净尽?灭菌完毕后什么情况下才可以打开锅盖取灭菌物品?

【◆参考答案◆】:排除灭菌器内原有的冷空气原因是:高压锅内存在冷空气时,虽压强达到规定数目,但实际温度却不足,会影响灭菌效果.灭菌完毕后,要等到压强降下来后,将气门慢慢打开,放气.排完气体后,开盖,取灭菌物品.

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