原代细胞培养(1)【◆题库问题◆】：[名词解释] 原代细胞培养
【◆参考答案◆】：
是指直接从有机体中取得细胞或组织后立即进行的培养，严格的说是指成功继代之前的培养，此时细胞保持原有的基本性质，通常把第一代到第十代以内的培养细胞统称为元代细胞培养。
是指直接从有机体中取得细胞或组织后立即进行的培养，严格的说是指成功继代之前的培养，此时细胞保持原有的基本性质，通常把第一代到第十代以内的培养细胞统称为元代细胞培养。
(2)【◆题库问题◆】：[名词解释] immunoelectron microscopy （免疫电镜）
【◆参考答案◆】：将抗体进行特殊标记后用电子显微镜观察免疫反应的结果。根据标记方法的不同，分为免疫铁蛋白技术、免疫酶标技术和免疫胶体金技术。
(3)【◆题库问题◆】：[多选] 以下哪一种媒介或方法可用来诱导细胞融合（）
A．电击
B．乙二醇
C．灭活的仙台病毒
D．灭活的新城鸡瘟病毒
E．体外细胞培养
A．电击
B．乙二醇
C．灭活的仙台病毒
D．灭活的新城鸡瘟病毒
E．体外细胞培养
【◆参考答案◆】：A, C, D
(4)【◆题库问题◆】：[问答题] 细胞培养应注意哪些问题？
【◆参考答案◆】：
体外培养细胞必须注意三个环节：物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基，它含有细胞生长必需的营养成分：但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分，对于特殊目的细胞培养是不利的。为此，研究人员正在探索无血清培养细胞的条件，并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节，所以，在无血清培养时仍然需要添加必要的因子，包括促细胞生长因子（如EGF.，促贴附物（如层黏连蛋白）和其他活性物质（如转铁蛋白）。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰，使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种，即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中，所以定期更换培养液，对于体外细胞培养也是至关重要的。
体外培养细胞必须注意三个环节：物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基，它含有细胞生长必需的营养成分：但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分，其中最重要的是血清，以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分，对于特殊目的细胞培养是不利的。为此，研究人员正在探索无血清培养细胞的条件，并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节，所以，在无血清培养时仍然需要添加必要的因子，包括促细胞生长因子（如EGF.，促贴附物（如层黏连蛋白）和其他活性物质（如转铁蛋白）。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰，使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种，即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中，所以定期更换培养液，对于体外细胞培养也是至关重要的。
(5)【◆题库问题◆】：[名词解释] 显微操作技术
【◆参考答案◆】：
是指在高倍复式显微镜下，利用显微操作器（micrcmanipulator）进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装臵。
是指在高倍复式显微镜下，利用显微操作器（micrcmanipulator）进行细胞或早期胚胎操作的一种方法。显微操作器是用以控制显微注射针在显微镜视野内移动的机械装臵。
(6)【◆题库问题◆】：[单选] 扫描电子显微镜可用于（）
A．获得细胞不同切面的图像
B．观察活细胞
C．定量分析细胞中的化学成分
D．观察细胞表面的立体形貌
E．都不是
A．获得细胞不同切面的图像
B．观察活细胞
C．定量分析细胞中的化学成分
D．观察细胞表面的立体形貌
E．都不是
【◆参考答案◆】：D
(7)【◆题库问题◆】：[名词解释] 密度梯度离心
【◆参考答案◆】：
是细胞组分通过某些梯度密度溶液离心使得各个成分互相分开的技术.操作时应将要分离细胞组分小心地铺在含有密度不断增加的、形成密度梯度的高溶解性的惰性物质（如蔗糖）溶液的表面。在这种条件下进行离心，不同组分以不同的沉降速率沉降，形成不同的沉淀带，而使不同的组分得以分离。
是细胞组分通过某些梯度密度溶液离心使得各个成分互相分开的技术.操作时应将要分离细胞组分小心地铺在含有密度不断增加的、形成密度梯度的高溶解性的惰性物质（如蔗糖）溶液的表面。在这种条件下进行离心，不同组分以不同的沉降速率沉降，形成不同的沉淀带，而使不同的组分得以分离。
(8)【◆题库问题◆】：[问答题] 简述细胞生物学的主要研究方法？
【◆参考答案◆】：
代表细胞生物学传统和发展方向的研究方法，可以分为四大方面。
（1）显微技术，这是进行细胞形态结构观察的方法，包括光学显微术、电子显微术和扫描隧道显微术等，目前的分辨本领已达到0.1nm的水平，可以直接观察到DNA．RNA和蛋白质等生物大分子及生物膜、病毒等结构。
（2）细胞组分的分析与原为检测技术，这类方法可对亚细胞结构和生物大分子进行分离和纯化，并可在细胞的原位上检测亚细胞结构和某些大分子的存在状况；
（3）细胞培养和细胞工程技术，这是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究和生物工程中重要的实验技术，具有广泛的、重要的理论意义和实践价值；
（4）分子生物学技术，如核酸和蛋白成分的分析和序列测定；核酸的杂交、PCR、基因的克隆与表达以及基因的剔除、RNA干扰技术等，这些都是当今细胞生物学研究中常常使用的实验方法。而且一些物理、化学和信息处理技术也正在被用于细胞生物学的研究。现代细胞生物学的方法及其多样和处于不断的发展当中。
代表细胞生物学传统和发展方向的研究方法，可以分为四大方面。
（1）显微技术，这是进行细胞形态结构观察的方法，包括光学显微术、电子显微术和扫描隧道显微术等，目前的分辨本领已达到0.1nm的水平，可以直接观察到DNA．RNA和蛋白质等生物大分子及生物膜、病毒等结构。
（2）细胞组分的分析与原为检测技术，这类方法可对亚细胞结构和生物大分子进行分离和纯化，并可在细胞的原位上检测亚细胞结构和某些大分子的存在状况；
（3）细胞培养和细胞工程技术，这是当前细胞生物学乃至整个生命科学研究和生物工程中重要的实验技术，具有广泛的、重要的理论意义和实践价值；
（4）分子生物学技术，如核酸和蛋白成分的分析和序列测定；核酸的杂交、PCR、基因的克隆与表达以及基因的剔除、RNA干扰技术等，这些都是当今细胞生物学研究中常常使用的实验方法。而且一些物理、化学和信息处理技术也正在被用于细胞生物学的研究。现代细胞生物学的方法及其多样和处于不断的发展当中。
(9)【◆题库问题◆】：[名词解释] electron microscope three-dimentional reconstruction technique (电镜三维重构技术)
【◆参考答案◆】：电子显微术、电子衍射与计算机图象处理相结合而形成的具有重要应用前景的一门新技术。电镜三维重构技术与X-射线晶体衍射技术及核磁共振分析技术相结合，是当前结构生物学，主要研究生物大分子空间结构及其相互关系的主要实验手段。
(10)【◆题库问题◆】：[单选] 光镜同电镜比较，下列各项中哪个是不正确的（）
A．电镜用的是电子束，而不是可见光
B．电镜样品要在真空中观察，而不是暴露在空气中
C．电镜和光镜的样品都需要用化学染料染色
D．用于电镜的标本要彻底脱水，光镜则不必
E．电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，光镜则不必
A．电镜用的是电子束，而不是可见光
B．电镜样品要在真空中观察，而不是暴露在空气中
C．电镜和光镜的样品都需要用化学染料染色
D．用于电镜的标本要彻底脱水，光镜则不必
E．电镜观察的标本须制成厚度仅50nm的超薄切片，光镜则不必
【◆参考答案◆】：C