冰冻蚀刻冰冻蚀刻

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冰冻蚀刻

(1)【◆题库问题◆】:[名词解释] 冰冻蚀刻

【◆参考答案◆】:
电子显微镜技术:是为配合透射电镜观察而设计的一种标本制作技术。其原理及过程是用快速低温冷冻法将样品迅速冷冻,然后在低温下进行断裂。这时,样品往往从其结构相对脆弱的部位(膜脂双分子层的疏水端)断裂,从而显示出镶嵌在膜脂中蛋白质颗粒。由于冰在真空中少量升华,可进一步增强浮雕式的蚀刻效果。用铂、金等金属进行倾斜喷镀,以形成对应于凹凸的电子反差,在经碳垂直于断面进行真空喷镀形成一个连续的碳膜,然后,用消化液把赝品本身消化掉,将剩下的碳膜及其构成图形的金属微粒移到载网上用电镜进行观察。冰冻蚀刻技术主要用于观察膜断裂面的蛋白质颗粒和膜表面结构,图形富有立体感,样品不需包埋甚至也不需固定,同时能更好地保持样品的真实结构。它是研究生物膜内部结构的一种有用技术。

(2)【◆题库问题◆】:[名词解释] 显微放射自显影

【◆参考答案◆】:
是将放射性分子引入机体或细胞,使其渗入生物大分子,或结合于一定部位.在利用放射性同位素的电离辐射对乳胶的感光作用显示样品中放射物质的所在.由此指示某种生物大分子质合成及部位,或特定物质的定位.

(3)【◆题库问题◆】:[名词解释] karyoplast(核体)

【◆参考答案◆】:细胞经松胞菌素处理后,排出的带有质膜和少量细胞质的细胞核。

(4)【◆题库问题◆】:[名词解释] 分辨率

【◆参考答案◆】:
指人眼或显微镜在25cm明视距离处,能分辨被检物体细微结构最小距离的能力,其单位为长度单位,常用的有毫米、微米、纳米等。

(5)【◆题库问题◆】:[名词解释] 原代细胞培养

【◆参考答案◆】:
是指直接从有机体中取得细胞或组织后立即进行的培养,严格的说是指成功继代之前的培养,此时细胞保持原有的基本性质,通常把第一代到第十代以内的培养细胞统称为元代细胞培养。

(6)【◆题库问题◆】:[单选] 利用放射性核素标志物质能使照相乳胶感光的原理来探测细胞内某种物质的含量与分布的方法是()
A.放射自显影技术
B.免疫荧光显微镜技术
C.免疫电镜技术
D.液相杂交技术
E.原位杂交技术

【◆参考答案◆】:A

(7)【◆题库问题◆】:[名词解释] Hybridoma(杂交瘤)

【◆参考答案◆】:一种通过融合而形成的杂交细胞,是由正常细胞和具有某种缺陷的肿瘤细胞杂交而获得。

(8)【◆题库问题◆】:[单选] 下面哪―种措施与提高显微镜分辨能力无关()
A.使用放大倍率较高的目镜
B.使用折射率高的介质
C.扩大物镜直径
D.使用波长较短的光源
E.都无关

【◆参考答案◆】:A

(9)【◆题库问题◆】:[问答题] 细胞培养应注意哪些问题?

【◆参考答案◆】:
体外培养细胞必须注意三个环节:物质营养、生存环境和废物的排除。
体外培养细胞所需的营养是由培养基提供的。培养基通常含有细胞生长所需的氨基酸、维生素和微量元素。一般培养细胞所用的培养基是合成培养基,它含有细胞生长必需的营养成分:但是在使用合成培养基时需要添加一些天然成分,其中最重要的是血清,以牛血清为主。这是因为血清中含有多种促细胞生长因子和一些生物活性物质。
由于血清中含有一些不明成分,对于特殊目的细胞培养是不利的。为此,研究人员正在探索无血清培养细胞的条件,并已经取得一些进展。由于机体内的细胞生长通常需要不同的细胞因子进行调节,所以,在无血清培养时仍然需要添加必要的因子,包括促细胞生长因子(如EGF.,促贴附物(如层黏连蛋白)和其他活性物质(如转铁蛋白)。无血清培养排除了有血清培养时血清中不明因素的干扰,使实验结果更加可靠。
体外细胞培养必须模拟体内细胞生长的环境。环境因素主要是指无菌环境、合适的温度、一定的渗透压和气体环境。气体主要有两种,即O2和CO2。后者对于维持细胞培养液的酸碱度十分重要。
活体内生长的细胞所产生的代谢物和废物通过一定的系统进行利用和排除。体外培养细胞产生的代谢物和废物积累在培养液中,所以定期更换培养液,对于体外细胞培养也是至关重要的。

(10)【◆题库问题◆】:[名词解释] 细胞融合

【◆参考答案◆】:
真核细胞通过介导和培养,两个或多个细胞合并成一个双核或多核细胞的过程称为细胞融合(cellfusion).基因型相同的细胞融合成的杂交细胞称为同核体(homokaryon);来自不同基因型的杂交细胞则称为异核体(heterokaryon)。

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